L’analyse protéomique commence par une lyse, suivie d’une purification. Les tampons de lyse comprennent des détergents et d’autres réactifs pour obtenir une solubilité efficace des protéines. Cet article présente une sélection de tampons de lyse, de kits et de produits biochimiques associés couramment utilisés.
La diversité des échantillons sources et des protéines ne nous permet pas de proposer une solution universelle. Une première possibilité est d’essayer les tampons prêts à l’emploi connus pour fonctionner sur la majorité des organismes. Ensuite, il existe des kits spécialisés pour certaines protéines ou comme le kit Minute™ ci-dessous, optimisés pour les organismes tels que les bactéries.
Pour améliorer la lyse en fonction des besoins spécifiques, nous proposons un ensemble complet d’inhibiteurs de protéase, de détergents et d’autres produits biochimiques de haute pureté, dédiés aux applications biologiques.
Tampon de lyse et d’extraction RIPA
Pour la lyse optimale des cellules adhérentes et en suspension – compatible avec la purification
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Un tampon de lyse complet pour les protéines cytoplasmiques, membranaires et nucléaires à partir de cellules de mammifères cultivées en suspension et adhérentes. Le tampon de lyse RIPA est entièrement compatible avec de nombreuses applications, y compris les dosages rapporteurs, les dosages de protéines (BC Assay), les dosages immunologiques et autres techniques de purification des protéines. Elle est préférée pour les protéines nucléaires, cytoplasmiques et mitochondriales, tandis que les protéines au niveau des structures cytosquelettiques et extracellulaires sont plus solubles dans l’urée. |
Le tampon de lyse RIPA ne contient pas d’inhibiteurs de protéase, mais il est entièrement compatible avec une gamme d’inhibiteurs de protéase et de cocktails individuels.
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Digestion des protéines |
Identification et analyse des protéines par spectrométrie de masse (HPLC-MS) |
RIPA lysis and Extraction Buffer HG4361 100mL
Contenu 25mM Tris, 150mM Sodium Chloride, 1% NP-40, 1% Sodium Deoxycholate, 0.1% SDS, pH 7.6
Recherchez des tampons RIPA en ligne.
Minute™ Bacterial Total Protein Extraction Kit
Pour extraire rapidement les protéines totales de cellules bactériennes cultivées pour des applications telles que SDS-PAGE, immunoblot, ELISA et d’autres applications.
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Minute™ Bacterial Total Protein Extraction Kit est composé de tampons de lyse cellulaire dénaturants optimisés et de cartouches filtrantes d’extraction de protéines avec des tubes de collecte de 2,0mL. Le kit est conçu pour extraire rapidement les protéines dénaturées des bactéries. Il contient suffisamment de matériaux pour l’extraction des protéines totales d’une culture d’E. coli de 100mL. |
Comparaison des profils protéiques extraits par le kit Minute™ et le tampon RIPA.
Les pistes 1, 2 et 3 sont des protéines extraites par le kit Minute™,
le tampon RIPA et la fraction insoluble de l’extraction RIPA respectivement.
Minute™ Bacterial Total Protein Extraction Kit SB-004 50 preps
Contenu 25mL tampon de lyse bactérienne A + 2,5mL tampon B + 50 cartouches filtrantes d’extraction de protéines (500µL) + 50 tubes de prélèvement avec bouchon
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Inhibiteurs de protéases
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Les inhibiteurs de protéase sont des molécules qui inhibent la fonction protéase en se liant de manière réversible ou irréversible à l’enzyme. La plupart des inhibiteurs ne sont actifs que contre un ou deux types de protéases. |
Protéases à Sérine |
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AEBSF | Hydrochloride >98% | 401070 | 100mg |
401071 | 1g | ||
Aprotinin | Powder, bovine lung 6300 KIU/mg, 3.5 pH.Eur.U/mg | BXH470 | 100mg |
Solution, 200 000KIU/mL – Pharma Grade | 24431A | 50mL | |
PMSF | >99,9% | 147376 | 5g |
24431A | 50mL | ||
Benzamidine | Hydrochloride, anhydrous, >99% | 003055 | 100g |
Métalloprotéases |
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EDTA | Disodium Salt >99.5%, Molecular Biology Grade | 036290 | 1kg |
EGTA | >99 % | 10075A | 25g |
1,10-Phenanthroline | Anhydrous, >99 % | E4414E | 25g |
Protéases à Cystéine |
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E-64 | >99% | 789581 | 5mg |
789582 | 25mg | ||
Iodoacetamide | >99 % | 020483 | 25g |
Leupeptin | Hemisulfate >97%, Synthetic | 201736 | 25mg |
NEM | N-Ethylmaleimide >98 % | 04474B | 25g |
Protéases à Aspartate |
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Pepstatin | >90 % | 827752 | 25mg |
Cocktails d’inhibiteurs de protéase |
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Protease Inhibitor Cocktail I General use (AEBSF Hcl 500µM, Aprotinin 150nM, E-64 1µM, EDTA 0,5mM, Leupeptin 1µM) |
WT0900 | 1 flacon | |
Protease Inhibitor Cocktail II for Bacteria (AEBSF Hcl 20mM, Bestatin 1,7mM, E-64 200µM, EDTA 85mM, Pepstatin A 2mM) |
WT8260 | 1 flacon |
Détergents
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Les détergents sont utilisés pour séparer les protéines membranaires de la membrane et pour ouvrir des compartiments intracellulaires comme les lysosomes. Ils peuvent stabiliser certaines protéines en milieu hydrophile. |
Nondénaturant |
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CHAPS | >98 % | 33351A | 10g |
Triton X-100 | 10% solution, Carbonyl and peroxide free (>99%) | BT84L0 | 50mL |
10 % solution, Oxidant-free | 521121 | 5x10mL | |
Dénaturant |
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SDS | 20 % solution, 0.2 micron filtered, MB grade | 896826 | 500mL |
Autres
Qualité Biologie Moléculaire (exempte de DNase et de RNase) |
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Guanidine HCl | >99.5 %, chaotropic agent | 018380 | 500g |
D-Glucose | Anhydrous, >99.9% | 40250B | 500g |
Glycerol | >99.8%, Sterile | 047624 | 500mL |
EDTA | disodium salt, >99.5% | 036290 | 1kg |
DTT | >99 % | 054721 | 5g |
Urea | >99.5%, Ammonia-, Cyanate-free | 031904 | 1kg |
Tris | 1M pH 7.5, Sterile solution | N13713 | 1L |
En savoir plus :
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